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大鼠環磷酸鳥苷- 磷酸腺苷合成酶(cGAS)ELISA試劑盒

大鼠環磷酸鳥苷- 磷酸腺苷合成酶(cGAS)ELISA試劑盒

  • 大鼠環磷酸鳥苷- 磷酸腺苷合成酶(cGAS)ELISA試劑盒詳情
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本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷

 


樣品收集、處理及保存方法

1.  樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。

2.  標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測。

4.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

  1. 酶標儀(450nm)

  2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

  3. 37℃恒溫箱

    操作注意事項

  4.   試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

  5.   實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

  6.   濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

  7.   嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

  8.   所有液體組分使用前充分搖勻。

    試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

12孔×8條

12孔×4條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

注:標準品(S0-S5)濃度依次為:找客服索取新版說明書

試劑的準備

 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

  1.   手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

  2.   自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    操作步驟

  3.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  4.   設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

  5.   樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

  6.   除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  7.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

  8.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  9.   每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

    結果判斷

     繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

     

     

    試劑盒性能

  10.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。


  1.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

  2.  重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

  3.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

  4.  有效期:6個月

    免責聲明

  5.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

      嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。

 


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