土壤硝態(tài)氮測試盒（微量法）
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土壤硝態(tài)氮含量檢測試劑盒說明書 微量法
注意：正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號(hào)：4079
規(guī)格：100T/96S
試劑一：粉劑×2 支，4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加 1mL 濃硫酸充分溶解。試劑二：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 瓶，4℃保存。10 mg 硝酸鉀，臨用前加入 1.386mL 蒸餾水溶解，配成 1000μg/mL
的 NO3--N 標(biāo)準(zhǔn)液
硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素，土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接關(guān)系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。
在濃酸條件下，NO3-與水楊酸反應(yīng)生成硝基水楊酸，在堿性條件下（PH>12）呈黃色，其顏色深淺與含量成正比，即可計(jì)算得硝態(tài)氮含量。
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、振蕩器、蒸餾水。
一、硝態(tài)氮提取：
按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 土樣，加入 1mL 蒸餾水）加入蒸餾水，置于振蕩儀中振蕩提 1h，25℃，10000 離心 10min，取上清待測。
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 410nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將 1000μg/mL NO3--N 標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水 40 倍稀釋成 25μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3、 操作表：
試劑名稱 | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本（μL） | 8 | ||
標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL） | 8 | ||
蒸餾水（μL） | 8 | ||
試劑一（μL） | 12 | 12 | 12 |
充分混勻，25℃靜置 30min | |||
試劑二（μL） | 280 | 280 | 280 |
混勻，渦旋振蕩，使出現(xiàn)的沉淀充分溶解，取 0.2mL 于微量玻璃比色皿或 96 孔板中測定 410nm 處吸光值 A，計(jì)算△A=A 測定管-A 空白管，△A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。 | |||
NO3--N 含量（μg/g 土壤）=△A÷（△A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)準(zhǔn)）×V 提取÷W=25×△A÷△A 標(biāo)準(zhǔn)÷W。
W：樣本質(zhì)量，g；C 標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，25μg/mL；V 提取：提取液體積，1mL。
1、 試劑一配制好后盡快使用，4℃可保存一周。
2、 試劑一和試劑二均具有強(qiáng)腐蝕性，操作時(shí)需做好防護(hù)措施。
3、 △A 大于 1.5 時(shí)，建議將樣品稀釋后再進(jìn)行測定。
